留住最美那一刻 破卵針後多久凍卵?

卵子冷凍逐漸盛行的今日,凍卵技術的要求也更精益求精,找到卵子最適合的冷凍時間,對於提升解凍卵子後的結果也十分重要。
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2020-07-31
作者 Saki


卵子是非常精細的細胞,玻璃化凍解卵過程中,必須維持滲透壓、溫度控制良好,才能使卵子的細胞膜、紡錘體 、細胞骨架以及胞器(如:粒線體)的傷害降到最低。除此之外,在卵子取出後最合適的時間冷凍,也可以避免傷害紡錘體,提升解凍卵子成績。在卵子冷凍逐漸盛行的今日,凍卵技術的要求也更精益求精,無論是操作方式、時間、針對不同卵子的個別化冷凍,都是胚胎師們亟欲知道的「撇步」。

2019台灣生殖醫學會中, 一間生殖中心 團隊統計了2018年6月~2019年2月共63位解凍卵子

客戶的成績,分別探討以下主題對於解凍成績的影響:

1. 卵子年齡

2. 破卵針注射~卵子冷凍間隔時間

3. 冷凍平衡過程卵子外觀變化

4. 冷凍平衡時間長短

卵子年齡

63位客戶之總解卵數為463顆,如表一所示,依照卵子年齡分為三組,發現三組的解凍存活

率相當,無統計差異。

表一、不同年齡族群之解卵存活率

年齡

解卵顆數

存活顆數

存活率(%)

p 值

總數

463

445

96.11

無差異

<38

67

66

98.51

無差異

38~40

169

164

97.04

無差異

41~47

227

215

94.71

無差異

破卵針注射~卵子冷凍間隔時間

依照注射破卵針到卵子冷凍的間隔時間分為四組:<38小時、38~39小時、>39小時、以及體

外成熟(IVM)卵子,發現取出時即成熟之卵子(MII)在不同時間區間冷凍下,存活率沒有差別,落在

97~100%之間;而取出時觀察未成熟,於後續體外培養才成熟之卵子(IVM)的存活率,則下降為

71.43%。

圖二、不同破卵針後間隔時間之解凍存活率

冷凍平衡過程卵子外觀變化

冷凍過程中平衡步驟目的在於將高滲透壓之冷凍保護劑與卵子細胞內水分強迫交換,避免超

高速降溫過程中細胞內水分生成冰晶,進而傷害卵子,影響解凍存活率。當卵子一進入高滲透壓

之冷凍保護劑時,會產生皺縮,觀察皺縮現象略分為如圖三顯示之A(球形皺縮)、B(角度皺

縮)、C(不規則皺縮)三種,過去研究推測,A現象之卵子品質較好、B現象次之、C現象最差。

但統計後續解凍存活率,三種現象間並無明顯差異(表四),可能需再探討其他參數。

圖三、冷凍平衡時卵子外觀變化

表四、不同卵子外觀變化之解凍存活率

卵子外觀

A

B

C

存活率(%)

95.00

96.10

96.89

冷凍平衡時間長短

平衡過程可藉由觀察卵子皺縮又回脹的狀況,來判斷水分是否交換完成,若脹回表示已平衡

完成,則可進行下一步脫水、冷凍。標準回脹時間為12~15分鐘,不同卵子恢復時間不同,依據回

脹時間分為三組,發現三組之解凍存活率也沒有統計上差異。

圖三、不同冷凍平衡時間之解凍存活率

正好於2019年5月之ASPIRE(亞太生殖醫學大會),送子鳥也發表類似主題,結果略為不同,

研究當GnRH為破卵針時,冷凍卵子時間對於解卵培養成績及懷孕結果是否有影響,回溯統計

2017.10~2018.10期間,396卵子庫借卵週期,共7224顆解凍卵子。其中3313顆卵子為破卵針後

38小時冷凍,3911顆卵子為破卵針後40小時冷凍。

如下圖,破卵針後38小時冷凍之卵子,培養結果的成績皆稍高,尤其存活率及好囊胚率達統

計意義。

進一步統計兩組卵子之懷孕結果,懷孕率及著床率均無差異,顯示不論冷凍間隔為何,後續

只要發育為好囊胚,可具相同懷孕潛力。

凍卵是送子鳥對客戶最重要的承諾,因此在每次操作時無不戰戰兢兢謹慎以對,針對高齡、

卵少或成熟度較差的客戶,冷凍前會特別觀察紡錘體,避開可能造成傷害的狀況,如同專業廚師

於烹飪前須先了解所有食材狀況,調整刀工、火候及入菜時間,我們也希望盡所能掌握每顆卵的

最佳冷凍時間,幫求子夫妻創造最大效益。

評論

Ian
Ian
  1. 有許多因素影響著卵子解凍後的成效,目前許多研究的統計,不管是年齡、破卵針至凍卵時間、凍卵時的卵子外觀變化、凍卵時的平衡時間,都展現出若有似無的影響。但有一項影響是比較顯著的,體外成熟的卵子,解凍成效是預期性的較不好。
  2. 在體外成熟的卵子,其顆粒細胞與卵子間的賀爾蒙調控作用,相較於體內成熟的卵子,變動性是較大的,可能反應在成熟過程,卵質與卵核不同步,進而影響解凍成效。若是體外成熟的時間愈久,趨勢則越明顯。
  3. 然而,外觀看似成熟,伴隨著第一極體的卵子,事實上卻不一定是真的熟卵。若紡垂體是正在介於第一極體與卵核之間的,其實是 Telophase 卵,並不是真的 Metaphase II 的卵子。故此時,以紡垂觀測儀先確認,可避免冷凍在 Telophase 時期,降低紡垂體因冷解凍斷裂的機會。以增加臨床卵子的可用率。

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