胚胎植入（Embryo transfer）的挑選不外乎從觀察形態及分裂速率著手。然而有文獻指出，在動物模式中，胚胎分裂速度較快的胚胎通常是雄性的（Avery et al, 1991）。1995年Tarin等人在人類生殖期刊（Human Reproduction）發表的文章中，也從人類胚胎觀察到此現象的存在。同年，Ray等人發現，在體外培養至同一時期，雄性胚胎比雌性胚胎在分裂速度和代謝活性均要來得快，且此現象會持續至植入之前。
因為培養液的不斷改良，使得胚胎在體外培養至囊胚期（Blastocyst）可以得到較好的品質。現今的趨勢，培養至囊胚期再植入，不但可以使著床率提高，也因為可減少胚胎植入的數目，而降低多胞胎的風險。
囊胚期胚胎大約在受精後培養至第五天會形成（120~124 小時），植入條件的選擇主要為形態的觀察，包括了囊胚腔擴張的程度（Expansion of blastocoel）、內細胞團（Inner cell mass: ICM）及滋養層細胞（Trophectoderm：TE cells）的細胞排列。
若細胞分裂速度較快的有較大的機率是雄性胚胎，那麼，在第五天觀察到形態良好的囊胚期胚胎是不是雄性胚胎佔了較大的比率呢？或者是說，是不是以目前選擇囊胚期胚胎的條件更傾向於選擇到雄性胚胎？因此，為了找出解答，Luna等人在紐約的生殖中心統計了 2003 年八月至 2005 年八月，共計 937 個IVF生產記錄及 1284 位成功產下的胎兒，分析第三天植入和囊胚期植入胎兒性別的比率。
材料與方法
囊胚期分級方法（修改自Gardner and Schoolcraft classification）：
（a）依囊胚腔擴張的程度及孵化程度（Hatching status）分級
- 囊胚腔的大小小於整體胚胎一半的早期囊胚
- 囊胚腔的大小等於或大於整體胚胎一半的囊胚
- 囊胚腔完全佔據囊胚的體積
- 擴張的囊胚期囊胚腔的大小大於早期胚胎體積，且透明帶（Zona pellucida）較薄
- 正在孵化的囊胚，其滋養層細胞開始脫出至透明帶層外面
- 已孵化的囊胚，完全脫出至透明帶外面
（b）以（a）3~6 級再以內細胞團（ICM）區分
- 很多細胞緊緊相連
- 多個細胞，成群但較鬆散
- 少數細胞，排列鬆散
- 很少細胞，排列不規則，且細胞大小不均
（c）以（a）3~6 級再以滋養層細胞（TE cells）區分
- 很多細胞構成一層，排列規則，互相連結
- 少數細胞構成一層，排列較鬆散
- 很少細胞，且細胞較大
- 更少細胞，且細胞大小不一
將第 3 天植入和第 5 天囊胚期植入成功生產的胎兒根據性別做統計比較，另外也統計了卵子受贈與自用卵子在第3天植入與第5天植入成功生產之胎兒其男女性別的比例。
結果
在全數共 937 次生產，有 1284 位胎兒誕生，其中第 3 天植入的女：男比例顯然高過於第 5 天植入的女：男比例（48.8%：51.2% vs 42.3%：57.7%）。
若以總數 603 個單胞胎來看，第 3 天植入為男生的比例佔 51.5%，而第5天植入為男生的比例佔 63.7%；從多胞胎角度來看，全數共334次生產，有 681 位胎兒誕生，其第3天植入與第 5 天植入為男生的比例則沒有明顯差別（50.9%：52.8% ）。
在自用卵子所生產的 1060 位胎兒中，第5天植入為男生的比例也較第3天植入來得高（58.3%：51.2%）；在受贈卵子方面，也發現具有相同的趨勢，但唯取樣數不足，在統計學上無法相比較。
作者進一步去分析囊胚期胚胎的分級標準是否會造成挑選到的雄性胚胎機率上升？從 100% 著床率生產的 74 位男嬰和 57 位女嬰經回溯性分析，雌性胚胎在內細胞團和擴張程度的分級較雄性胚胎略勝一籌；而雄性胚胎則是在滋養層細胞的分級領先著雌性胚胎。但由統計學的角度來看，事實上是沒有顯著差異的。
討論
- 早期有許多類似的研究，比較胚胎分裂速度及第三天和第五天植入對於生男生女的比例影響，都發現生男的機會較生女的機率高，不過以統計學上的分析，是沒有顯著差異的。
- Anderson 等人在 2001 年也發表了第三天和第五天植入，男女性別比例的報告，並未發現有性別比例失衡的現象；並且也推測挑選胚胎的條件及觀察內細胞團和滋養層細胞的形態在性別比例上可能有一些影響。
- 本篇為第一個探討囊胚期植入經回溯性分析在統計學上有明顯性別差異的研究報告，其中單胞胎個案更是明顯有男女比例上的不同。
- 進一步探討囊胚期形態和內細胞團及滋養層細胞的分級在性別比例上的影響，結果沒有顯著差異。然而從單胞胎個案的結果，作者認為挑選到完全擴張的囊胚（Most fully expanded blastocyst）是造成雄性胚胎比率上升的因素。
- 挑選好胚胎植入為的是增加著床的機會，然而在本篇研究中卻也造成男女比例失衡的現象；除了往後在挑選囊胚期胚胎的分級標準做些修改外（尤其是針對準備進行單一囊胚植入術的個案），作者希望將來能經由延長培養（Extented culture）來了解雄性和雌性胚胎在形成囊胚的過程中相異之處（Early differences in sexual dimorphism）。
參考資料
- Luna et al. Blastocyst embryo transfer is associated with a sex-ratio imbalance in favor of male offspring. Fertility and Sterility. 2007 Vol. 87. p519~523.
